
BCA蛋白定量試劑盒
產品簡介:
堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。
BCA 法快速靈敏、穩定可靠,對不同種類蛋白質檢測的變異系數非常小。BCA 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響。在組織細胞蛋白提取過程中,常用濃度的去垢劑SDS,Triton X-100,Tween不影響檢測結果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發現樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可用BestBio貝博Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
產品組成:
產品組成
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301001(250 assays)
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301002(1000 assays)
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蛋白標準(1mg/ml)
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0.5ml
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2ml
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50ml
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200ml
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BCA試劑B
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1ml
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4ml
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使用方法:
A. 96孔酶標板測定:
1. BCA工作液配制。根據樣品數量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。根據樣品數量,按體積試劑加體積試劑配制適量工作液,充分混勻。例如試劑加試劑,混勻,配制成工作液。工作液室溫小時內穩定。根據樣品數量,按體積試劑加體積試劑配制適量工作液,充分混勻。例如試劑加試劑,混勻,配制成工作液。工作液室溫小時內穩定。根據樣品數量,按體積試劑加體積試劑配制適量工作液,充分混勻。例如試劑加試劑,混勻,配制成工作液。工作液室溫小時內穩定。
2. 標準曲線繪制。取一塊酶標板,按以下表格數據加入試劑:
孔號
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0
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1
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2
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3
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4
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5
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6
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7
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蛋白標準(ml)
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0
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1
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2
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4
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8
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12
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16
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20
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去離子水(ml)
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20
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19
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18
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16
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12
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8
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4
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0
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BCA工作液(ml)
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200
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200
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200
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200
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200
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200
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200
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200
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對應的蛋白含量(mg)
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0
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1
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2
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4
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8
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12
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16
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20
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3. 振蕩混勻后,37℃放置30分鐘。
4. 用酶標儀測定A562,以不含BSA的光吸收值為空白對照。
5. 以蛋白含量(mg)為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪出標準曲線。
6. 樣品測定:將待測蛋白樣品用去離子水稀釋至適當濃度,取20ml樣品,加入200ml BCA工作液,混勻后37℃放置30分鐘,然后以0號孔為對照,測定樣品吸收值A562。
7. 根據測得的吸收值,在標準曲線上即可查得樣品的蛋白含量。
8. 計算蛋白濃度:以查得的蛋白含量除以樣品體積20ml,再乘以相應的稀釋倍數即可得到待測樣品的實際濃度。
B. 比色皿測定
按照比色皿規格,與以上方法相同,適當按比例增加各溶液體積即可。
儲存條件:
BCA試劑室溫保存。蛋白標準-20°C保存。 有效期:一年。
注意事項:
1. 在低溫條件或長期保存出現沉淀時,可攪拌或37℃溫育使溶解, 如發現細菌污染則應丟棄。
2. 因為BCA法測定時顏色會隨著時間的延長不斷加深,并且顯色反應的速度和溫度有關,所以除非精確控制顯色反應 的時間和溫度,否則如需精確測定,每次測定都需重做標準曲線。若需得到更為精確的蛋白濃度結果,每個蛋白梯 度和樣品均需做復孔。
3. 若測定標準曲線時發現隨著標準品濃度的增加吸光度或顏色 沒有明顯變化,原因可能是樣品中含有嚴重干擾BCA法測定蛋白濃度的物質。BCA蛋白濃度測定試劑盒對樣品中各種物質詳細的兼容性,參見附件BCA蛋白濃度測定兼容性表。
4. 試劑A 與試劑B 用應密閉保存。
5. 當試劑A 和B 混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失。
6. 使用溫箱孵育時,應注意防止因水份蒸發影響檢測結果。
附表:
以下是不干擾BCA方法測定的物質濃度:
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成分
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相容濃度
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成分
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相容濃度
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NP-40
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5.0%
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葡萄糖
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10mM
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Emulgen
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1.0%
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EDTA
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10mM
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Hepes
|
100mM
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Sodium Chloride
|
1.0M
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DTT
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1mM
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NaOH
|
0.1M
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Guanidine•HCl
|
4.0M
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Ammonium Sulfate
|
1.5M
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Triton X-100
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5.0%
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乙酸鈉 pH 5.5
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200mM
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辛基糖苷
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5.0%
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SDS
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5.0%
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Urea
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3.0M
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Brij-35
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5.0%
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蔗糖
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40%
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Lubrol
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1.0%
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Glycine, pH 2.8
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100mM
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CHAPS
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5.0%
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相關產品
產品
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產品號
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規格
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核蛋白提取試劑盒
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310001
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50 assays
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核蛋白提取試劑盒
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310002
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100 assays
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總蛋白提取試劑盒
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310003
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50 assays
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總蛋白提取試劑盒
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310004
|
100 assays
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BCA 蛋白定量試劑盒
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301001
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250 assays
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BCA 蛋白定量試劑盒
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301002
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1000 assays
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Bradford 蛋白定量試劑盒
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301003
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250 assays
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Bradford 蛋白定量試劑盒
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301004
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1000 assays
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ECL化學發光檢測試劑盒
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320001
|
100ml
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ECL化學發光檢測試劑盒
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320002
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200ml
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蛋白Marker
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320001
|
1ml
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蛋白Marker
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320002
|
2ml
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更多BCA蛋白定量試劑盒,請電話垂詢。貝博品牌是一家蛋白質研究,細胞生物學,分子生物學,免疫學等方面的研究開發公司,一科將其引入廣東,作為其廣東區域代理,將為客戶提供最具性價比的常規免疫學試劑,如各種標簽抗體、內參抗體、常規一抗以及全系列二抗,抗體檢測底物以及相關試劑盒等。同時我們作為多家國際知名品牌的的中國代理或區域代理,能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產品感興趣,請致電020-28936965,020-22309886或15902098758到一科生物科技有限公司垂詢相關的產品信息及完整實驗解決方案。 |